包括的線溶活性測定法 global fibrinolytic assay

線溶過程はプラスミノゲン活性化とフィブリン分解の２段階に単純化できる。しかしながら凝固系の種々凝固時間測定法とは異なり、包括的に活性を測定する一般的な検査法はない。血漿で作成したクロットの自然溶解に数日を要することが主な理由である。これを短縮し包括的線溶活性を測定する臨床検査法が模索されている。

【測定法・測定原理】

（１）ユーグロブリンクロット溶解時間（ECLT）、希釈血液（血漿）クロット溶解時間
ECLTは血漿ユーグロブリン分画で作成したクロット（血栓、凝血塊）が自然溶解するまでの時間で、各血漿固有の線溶ポテンシャルを総合的にあらわす。ユーグロブリン分画は血漿の酸性領域（pH 5.2）の等電点沈殿分画で、α2アンチプラスミン（α2AP）やα2マクログロブリン（α2M）などプラスミンインヒビターを含まない。このため溶解時間は短く臨床検査として成り立つ。
希釈血液（血漿）クロット溶解時間は、全血あるいは血漿を約10倍希釈することによりα2APを主体とするインヒビターの影響を弱め溶解時間を短縮している。
両者ともに、主にplasminogen activator inhibitor 1（PAI-1）と組織型プラスミノゲンアクチベータ（tPA）量とのバランスで決まる tPA活性を反映する^１）。再現性の問題と検査の煩雑さからあまり測定されなくなったが、日内変動、炎症の有無、メタボリック症候群等、生理的な影響を鋭敏に捉える方法といえる。
（２）tPA添加血漿クロット溶解時間
血漿に一定量のtPAを添加することにより、溶解時間を短縮して線溶活性を測定する方法である。Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor（TAFI）の活性、α2APを主体とするインヒビター活性を推測するには良い方法である。TAFIa 阻害薬を用い、thrombomodulin（TM）/TAFI 系の機能評価も試みられている^２）。しかし過剰量のtPAを添加するので、tPAとPAI-1量で規定されている線溶活性発現ポテンシャルを評価するのは難しい。
（３）Dダイマー産生能
全血を凝固させ一定時間（2-3時間）37°Cで放置後、上清中のDダイマー量を測定する方法である。あらかじめアプロチニンを添加したコントロールと比較する^３）。線溶系のいずれの過程の異常も反映する。

（４）plasmin generation assay
thrombin generation assay に準じた方法であり、tPA添加血漿クロット溶解時間測定の際に、プラスミンの発色基質を加えておき、生成プラスミン活性を経時的に測定する方法である^４,５）。プラスミンとα2APの反応速度はヘパリン非存在下のトロンビンとアンチトロンビンの反応の 103 倍速く、α2APによる不活性化の影響なしにプラスミン生成量を測定するのは困難である。実際には各反応時間における残存プラスミン活性（生成プラスミン量と不活性化プラスミン量の差）を測定していると考えられる。

いずれの測定法も個々の施設で正常値を設定している。通常、ECLTは3-10時間程度であるが、性、年齢、採血時間等の生理的要因により大きく変動する。またカルシウム添加により、内因性に産生されたトロンビンによりPAI-1活性が中和されて著明に短縮する。PAI-1欠損症例では1時間程度と短縮しており、またカルシウム添加による短縮を認めない。tPA添加血漿クロット溶解時間、および plasmin generation assay に関しては添加する tPA 量に応じて基準値は変動する。Dダイマー産生能に関しては、Dダイマー測定法により値は異なるが、原法では2.06 µg/mL（range 0.13–13.6 µg/mL）と報告されている。