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  • フィブリン重合 fibrin polymerization

    2025/06/12 更新
    2015/02/17 作成

    解説

    1)機序
    フィブリノゲン(Fbg)はトロンビン(活性化凝固第Ⅱ因子)によりAα16R(Arg)-17G(Gly)間が切断され16アミノ酸からなるフィブリノペプチドA (FPA)を放出し、遅れてBβ14R(Arg)-15G(Gly)間が切断され14アミノ酸からなるフィブリノペプチドB(FPB)を放出する。FPAの放出によりFbgはFibrin(Fbn)モノマーに転換し、α鎖に露呈された”knob-A”(Gly-Pro-Arg)が他のFbnモノマーのγ鎖に存在する”hole-a”と相補的に結合すること(A-a結合)で二本鎖のプロトフィブリルを形成する。Fbnモノマーが14-16個程度つながると、FPB放出により露呈された”knob-B”(Gly-His-Arg)と他のFbnモノマーのβ鎖に存在する”hole-b”との相補的な結合(B-b結合)により、プロトフィブリル同士の重合(lateral aggregation)が急速に進み、Fbn網(Fbn clot)が形成される。さらに活性化凝固第ⅩⅢ因子のトランスグルタミナーゼ作用によりFbn中のγ鎖同士(γ398Gln/399Gln-γ406Lys)が架橋されDダイマー(あるいはγダイマー)が形成され安定化Fbnとなる。

    2)フィブリン重合反応の実施(図)
    一般的には(精製)Fbg溶液に低濃度トロンビンを添加し、350 nmの波長でFbn形成による濁度の上昇を測定する。現在の基本的な反応条件は、緩衝液:0.02 M HEPES(pH7.4)、NaCl濃度:0.12 M、 Ca2+:1.0 mM、 Fbg:0.18 mg/ml、トロンビン:0.05 U/mlである。図中のLag periodとは、Fbnモノマーから二本鎖プロトフィブリルが形成され、さらにFbnモノマーが14-16個程度の長さにつながり、lateral aggregationが起こるまでの時間である。異常Fbgの機能を見るためには必須の検査であり、Lag period、傾き、ΔAbsの3パラメーターにより評価する。

    3)フィブリン重合反応の変動要因
    フィブリン重合反応はpH及び緩衝液、NaCl、Ca2+、フィブリノゲン、トロンビンの各濃度により影響を受ける。とりわけ、異常Fbgでは正常Fbg に比べてNaClやCa2+濃度の影響を強く受けることが知られている。

    図表

    • フィブリン重合反応曲線と解析項目

    参考文献

    1) 奥村伸生他:フィブリノゲン,検査と技術36:707-7015,2008.
    2) Weisel JW, Litvinov RI: Mechanisms of fibrin polymerization and clinical implications. Blood 121: 1712-1719, 2013.